增强型磷酸钙转染试剂（MaxiCaP）

试剂盒简介：

增强型磷酸钙转染试剂是本公司在传统试剂的基础上开发出的高效、低毒型细胞转染试剂。适合实验室常规瞬时细胞转染，并可用来筛选稳定表达克隆。本产品尤其适合在HEK 293细胞中进行逆转录病毒的包装，克服了脂质体等阳离子载体对细胞内病毒包装的抑制。增强型磷酸钙试剂对DNA的结合容量超过其它常用转染试剂，供转染的DNA片断可达到100kb。

试剂盒组分：

A：HBS （增强型）；B： CaCl₂ , 2M

实验操作流程：

Ø       按照60％左右的密度种植细胞入培养皿（瓶），细胞贴壁生长12-24小时后即可准备转染

Ø       准备1.5ml离心管，按照表一依次加入DNA、HBS和CaCl₂

Ø       振荡混匀后室温静置15分钟

Ø       吹打3－5次后均匀加到待转染细胞的培养液中，轻轻摇动培养皿（瓶）

Ø       放入CO₂孵箱继续培养

Ø       转染5小时后换液（该步骤可以省略）

Ø       24小时后检测目的蛋白质的表达

表一 、

注：如果您使用的细胞培养装置不在上表内，请根据细胞培养面积进行换算

图一、  HEK 293细胞转染pCMV-GFP 24小时后用荧光显微镜观察GFP的表达。左图：GFP；右图：相差图像。